نقش پروب در روش Real-time Animal Medical PCR Assay چیست؟

سلام! به عنوان تامین کنندهروش PCR پزشکی حیواناتمن به طور مستقیم نقش مهمی را که پروب ها در سنجش PCR پزشکی حیوانی در زمان واقعی ایفا می کنند، دیده ام. در این پست وبلاگ، می‌خواهم کاوشگرها چیست، چگونه کار می‌کنند و چرا در دنیای مراقبت از حیوانات اهمیت دارند.

پروب ها در Real-Time PCR چیست؟

بیایید با اصول اولیه شروع کنیم. در زمان واقعی PCR، یک پروب یک مولکول DNA یا RNA تک رشته ای کوتاه و تک رشته ای است که برای اتصال به یک توالی هدف خاص در DNA یا RNA پاتوژن یا ماده ژنتیکی که در تلاش برای تشخیص آن هستید، طراحی شده است. این کاوشگرها با یک رنگ گزارشگر فلورسنت در یک انتها و یک مولکول خاموش کننده در سمت دیگر برچسب گذاری می شوند.

هنگامی که کاوشگر دست نخورده است، مولکول خاموش کننده رنگ فلورسنت را از ساطع نور جلوگیری می کند. اما هنگامی که آنزیم DNA پلیمراز در طی فرآیند PCR، پروب را در حین تکثیر DNA هدف تجزیه می‌کند، رنگ فلورسنت از تأثیر کوئنچر آزاد می‌شود. این منجر به افزایش فلورسانس می شود که توسط دستگاه PCR قابل تشخیص است.

چگونه پروب ها در آزمایش های PCR پزشکی حیوانات در زمان واقعی کار می کنند؟

در آزمایش‌های PCR پزشکی حیوانی، پروب‌ها برای شناسایی پاتوژن‌های خاص مانند ویروس‌ها، باکتری‌ها یا انگل‌ها در نمونه‌های حیوانی استفاده می‌شوند. این فرآیند معمولاً با جمع‌آوری نمونه‌ای از حیوان مانند خون، بزاق یا بافت شروع می‌شود. سپس نمونه برای استخراج DNA یا RNA پردازش می شود.

هنگامی که ماده ژنتیکی استخراج شد، با پرایمرها، پروب ها و دیگر معرف ها در یک لوله واکنش PCR مخلوط می شود. پرایمرها توالی های DNA کوتاهی هستند که به DNA هدف در دو طرف ناحیه ای که می خواهید تقویت کنید متصل می شوند. سپس دستگاه PCR یک سری چرخه دمایی را برای تقویت DNA هدف طی می کند.

همانطور که DNA هدف تقویت می شود، پروب ها به توالی های مکمل خود در DNA تقویت شده متصل می شوند. هنگامی که DNA پلیمراز پروب ها را تجزیه می کند، سیگنال فلورسانس افزایش می یابد. دستگاه PCR این افزایش فلورسانس را در زمان واقعی اندازه‌گیری می‌کند و به ما امکان می‌دهد فرآیند تقویت را در صورت وقوع نظارت کنیم.

چرا پروب ها در سنجش PCR پزشکی حیوانات در زمان واقعی مهم هستند؟

خاص بودن

یکی از بزرگترین مزیت های استفاده از پروب ها در سنجش زمان واقعی PCR، ویژگی بالای آنها است. پروب ها برای اتصال به توالی های هدف بسیار خاص طراحی شده اند، به این معنی که می توانند حضور یک پاتوژن خاص یا نشانگر ژنتیکی را به دقت تشخیص دهند. این امر به ویژه در مراقبت های بهداشتی حیوانات مهم است، جایی که تشخیص دقیق برای درمان موثر بسیار مهم است.

به عنوان مثال، اگر یک دامپزشک مشکوک باشد که سگی دارای عفونت ویروسی خاصی است، یک آزمایش PCR در زمان واقعی با یک پروب خاص می‌تواند وجود ویروس را با دقت بالایی تأیید کند. این به دامپزشک اجازه می دهد تا درمان مناسب را تجویز کند و از مصرف داروهای غیر ضروری خودداری کند.

حساسیت

پروب ها همچنین سنجش زمان واقعی PCR را بسیار حساس می کنند. آنها می توانند سطوح بسیار پایین DNA یا RNA هدف را در یک نمونه تشخیص دهند که برای تشخیص زودهنگام بیماری ها مهم است. در بسیاری از موارد، تشخیص زودهنگام می تواند منجر به نتایج درمانی بهتر و شانس بالاتر بهبودی برای حیوان شود.

به عنوان مثال، در مورد یک بیماری مسری، تشخیص زودهنگام می تواند به جلوگیری از گسترش پاتوژن به حیوانات دیگر کمک کند. با استفاده از روش Real-time PCR با یک پروب حساس، دامپزشکان می توانند حیوانات آلوده را قبل از شروع علائم شناسایی کنند و اقدامات مناسب را برای مهار شیوع انجام دهند.

کمی سازی

یکی دیگر از ویژگی های مهم سنجش زمان واقعی PCR با پروب، توانایی کمی کردن مقدار DNA یا RNA هدف در یک نمونه است. این به عنوان PCR کمی (qPCR) شناخته می شود. با اندازه گیری سیگنال فلورسانس در نقاط زمانی مختلف در طول فرآیند PCR، می توانیم مقدار اولیه DNA یا RNA هدف را در نمونه تعیین کنیم.

این کمی سازی در بسیاری از کاربردها، مانند نظارت بر پیشرفت یک بیماری، ارزیابی اثربخشی یک درمان، یا مطالعه شیوع یک پاتوژن در یک جمعیت مفید است. به عنوان مثال، در یک مطالعه تحقیقاتی بر روی یک ویروس خاص در گروهی از حیوانات، از qPCR می توان برای اندازه گیری بار ویروسی در هر حیوان در طول زمان استفاده کرد.

کاربردهای پروب ها در آزمایش های PCR پزشکی حیوانات در زمان واقعی

تشخیص بیماری

همانطور که قبلا ذکر شد، پروب ها به طور گسترده ای در سنجش زمان واقعی PCR برای تشخیص بیماری در حیوانات استفاده می شوند. آنها می توانند انواع پاتوژن ها، از جمله ویروس ها (مانند پاروویروس سگ، ویروس لوسمی گربه ها)، باکتری ها (مانند سالمونلا، E. coli) و انگل ها (مانند توکسوپلاسما گوندی) را شناسایی کنند.

تشخیص دقیق و به موقع برای ارائه درمان مناسب به حیوانات بیمار ضروری است. دامپزشکان با استفاده از سنجش زمان واقعی PCR با پروب های خاص می توانند به سرعت علت بیماری را شناسایی کرده و برنامه درمانی مناسب را شروع کنند.

نظارت بر بیماری

پروب ها همچنین در برنامه های نظارت بر بیماری ارزشمند هستند. هدف این برنامه ها نظارت بر شیوع و گسترش بیماری ها در جمعیت های حیوانی است. با آزمایش منظم نمونه‌هایی از حیوانات و مکان‌های مختلف، می‌توانیم بیماری‌های نوظهور را شناسایی کنیم، شیوع بیماری‌های موجود را ردیابی کنیم و اقدامات کنترلی مناسب را اجرا کنیم.

به عنوان مثال، در یک مزرعه دام، می‌توان از سنجش بی‌درنگ PCR با پروب برای نظارت بر وجود پاتوژن‌های رایج در حیوانات استفاده کرد. اگر پاتوژن جدیدی شناسایی شود، مزرعه می تواند اقداماتی را برای جلوگیری از گسترش آن انجام دهد، مانند جداسازی حیوانات آلوده، بهبود اقدامات ایمنی زیستی یا واکسیناسیون حیوانات باقی مانده.

تحقیق کنید

در زمینه تحقیقات حیوانی، پروب‌ها در آزمایش‌های PCR بلادرنگ برای مطالعه جنبه‌های مختلف ژنتیک و بیماری حیوانات استفاده می‌شوند. آنها را می توان برای شناسایی جهش های ژنتیکی، مطالعه الگوهای بیان ژن، یا بررسی تعامل بین پاتوژن ها و میزبان آنها استفاده کرد.

به عنوان مثال، محققان ممکن است از روش‌های PCR بلادرنگ با پروب‌ها برای مطالعه اینکه چگونه یک ویروس خاص بر بیان ژن سیستم ایمنی حیوان تأثیر می‌گذارد استفاده کنند. این اطلاعات می تواند به توسعه واکسن ها یا استراتژی های درمانی جدید کمک کند.

نقش ما به عنوان تامین کننده آزمایش PCR پزشکی حیوانات

به عنوان تامین کنندهروش PCR پزشکی حیوانات، ما اهمیت پروب های با کیفیت بالا را در سنجش زمان واقعی PCR درک می کنیم. ما طیف گسترده ای از کاوشگرها را ارائه می دهیم که به طور خاص برای کاربردهای پزشکی حیوانات طراحی شده اند.

پروب های ما با دقت طراحی و ساخته شده اند تا از ویژگی، حساسیت و قابلیت اطمینان بالا اطمینان حاصل شود. ما از آخرین فناوری و اقدامات کنترل کیفیت استفاده می‌کنیم تا اطمینان حاصل کنیم که پروب‌های ما در سنجش‌های PCR بلادرنگ به طور مداوم عمل می‌کنند.

ما علاوه بر پروب ها، معرف ها و کیت های دیگری را نیز ارائه می دهیمتست آزمایشگاهی روی حیوانات. محصولات ما توسط دامپزشکان، موسسات تحقیقاتی و آزمایشگاه های بهداشت حیوانات در سراسر جهان استفاده می شود.

برای خرید و مذاکره با ما تماس بگیرید

اگر مایل به خرید محصولات سنجش PCR پزشکی حیوانی ما، از جمله پروب هستید، یا اگر در مورد محصولات یا خدمات ما سؤالی دارید، لطفاً با ما تماس بگیرید. ما همیشه خوشحالیم که به شما کمک کرده و مشتاقانه منتظر همکاری با شما برای بهبود سلامت حیوانات از طریق ابزارهای تشخیصی دقیق و قابل اعتماد هستیم.

مراجع

• Bustin, SA, Benes, V., Garson, JA, Hellemans, J., Huggett, J., Kubista, M., ... & Wittwer, CT (2009). دستورالعمل های MIQE: حداقل اطلاعات برای انتشار آزمایش های کمی PCR در زمان واقعی. شیمی بالینی، 55 (4)، 611-622.
• Mackay، IM، Arden، KE، و Nitsche، A. (2002). Real-time PCR در ویروس شناسی تحقیقات اسیدهای نوکلئیک، 30(6)، 1292-1305.
• Nolan, T., Hands, RE, & Bustin, SA (2006). تعیین کمیت mRNA با استفاده از RT-PCR بلادرنگ پروتکل های طبیعت، 1 (3)، 1559-1582.